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Le principe du microscope confocal a été décrit par Marvin Minsky en 1953, mais ce n’est qu’à la fin des années 1980 que des modèles commerciaux sont apparus, rendant cette technique accessible à de nombreux laboratoires. La plupart du temps, on utilise un laser comme source de lumière. On parle alors de microscope confocal à balayage laser d’où le nom de LSM pour "Laser Scanning Microscope".

Présentation du système

Le principe du microscope confocal est d’éliminer la lumière provenant des plans hors focus, à l’aide de trous d’épingles devant le détecteur. Ainsi, seule la lumière provenant du plan focal atteint le détecteur.

Ce microscope présente de nombreux avantages par rapport à un microscope plein champ :

• Résolution plus élevée (X,Y : 240 nm ; Z :400 nm)
• Excellente netteté (on élimine la fluorescence hors du plan focal)
• Observation de coupes épaisses (jusqu’à 100 µm)
• Observation simultanée de plusieurs sondes fluorescentes
• Coupes virtuelles et reconstitution 3D

Les confocaux modernes offrent des options intéressantes comme le détecteur spectral et des options logiciel comme FCS (Fluorescence Correlation Spectroscopy) et FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching).

Ces équipements permettent :

• L' acquisition d’images multi-marquages en XYZ (multipositions) et au cours du temps sur des échantillons fixés ou vivants.
• La thermorégulation et le contrôle CO2 pour le maintien des échantillons vivants.
• L’analyse spectrale
• Le FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)
• La FCS (Fluorescence Correlative Spectroscopy)

              2 postes sont disponibles sur la plateforme + 1 dispositif d'inversion du port inversé en port droit :